VDUP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400664

Descripción general

La proteína que interactúa con la tioredoxina (TXNIP), también conocida como VDUP1, es un regulador sensible al estado redox que se une a la tioredoxina para modular las respuestas celulares al estrés oxidativo y la homeostasis redox. TXNIP conecta la señalización de nutrientes y de estrés con el control metabólico al influir en la captación de glucosa, la función mitocondrial y las respuestas inflamatorias, y participa en vías como la señalización de AMPK, el manejo de especies reactivas de oxígeno (ROS) y procesos asociados al inflamasoma NLRP3. La alteración de la expresión de TXNIP/VDUP1 se ha asociado con desregulación metabólica, disfunción endotelial y estados inflamatorios, y se estudia con frecuencia en contextos de complicaciones relacionadas con la diabetes, biología cardiovascular y metabolismo de células cancerosas. Como gen inducible por estrés, TXNIP también se utiliza como marcador de lectura y como impulsor de programas transcripcionales aguas abajo del estrés del retículo endoplásmico (RE) y de la señalización oxidativa.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO VDUP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TXNIP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TXNIP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TXNIP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína VDUP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TXNIP para la investigación de la señalización de VDUP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TXNIP críticos para la función de VDUP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TXNIP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido VDUP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido VDUP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TXNIP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR VDUP1 (h) y el plásmido HDR VDUP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TXNIP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TXNIP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.