VAX1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423657

Descripción general

Vax1 codifica VAX1, un factor de transcripción homeobox requerido para el patrón embrionario del prosencéfalo y del ojo, con funciones destacadas en el desarrollo del telencéfalo ventral y del tallo óptico. VAX1 regula programas de expresión génica que coordinan la especificación de progenitores neurales, la guía axonal y la formación de la línea media, integrándose con vías de señalización del desarrollo como la ventralización mediada por SHH y otras redes homeobox. Estudios genéticos en ratón vinculan la disfunción de Vax1 con fenotipos congénitos craneofaciales y oculares, incluyendo microftalmia/anoftalmia y anomalías de la región hipotálamo–hipofisaria. Estas propiedades hacen de VAX1 un nodo útil para analizar el control transcripcional de trayectorias del neurodesarrollo y de las decisiones de linaje.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO VAX1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vax1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vax1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vax1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína VAX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vax1 para la investigación de la señalización de VAX1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Vax1 críticos para la función de VAX1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vax1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido VAX1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido VAX1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vax1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR VAX1 (m) y el plásmido HDR VAX1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vax1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vax1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.