Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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USP11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403368
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- USP11 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico USP11, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: USP11 Anticuerpo (C-6): sc-365528
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
USP11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403368 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
USP11 es una proteasa humana específica de ubiquitina que elimina ubiquitina de sustratos proteicos para regular su estabilidad, localización y salida de señalización. Mediante la desubiquitinación, USP11 contribuye al control de la proteostasis y modula vías relacionadas con la respuesta al daño del ADN, la regulación transcripcional y la progresión del ciclo celular. Las interacciones descritas sitúan a USP11 dentro de redes reguladoras dependientes de ubiquitina que influyen en la señalización de estrés y en procesos asociados a la cromatina. La actividad desregulada de USP11 se ha asociado con alteraciones en el control del crecimiento celular y en fenotipos de mantenimiento del genoma, lo que respalda su relevancia en la biología del cáncer y en otros trastornos que implican un desequilibrio en la señalización por ubiquitina.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO USP11 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen USP11 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del USP11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de USP11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USP11.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en USP11 para la investigación de la señalización de USP11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de USP11 críticos para la función de USP11
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de USP11 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido USP11 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido USP11 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus USP11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USP11 (h) y el plásmido HDR USP11 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología USP11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana USP11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.