UHRF1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403851-LAC

UHRF1 (ubiquitinähnlich mit PHD- und RING-Finger-Domänen 1) ist ein Multidomänen-Chromatinregulator, der während der S‑Phase die Erhaltung der DNA‑Methylierung mit der Erkennung von Histonmodifikationen koordiniert. Durch die Bindung an hemimethylierte CpG‑Stellen und die Interaktion mit DNMT1 fördert UHRF1 die Weitergabe epigenetischer Markierungen und beeinflusst dadurch Zellzyklusprogression, replizikationsgekoppelte Chromatinassemblierung und Genomstabilität. Die UHRF1‑vermittelte Rekrutierung von Ubiquitin‑Ligase‑Aktivität und Histon‑„Readern“ verknüpft DNA‑Methylierung, H3K9‑Methylierung und die Organisation von Heterochromatin und prägt so Transkriptionsprogramme. Eine fehlregulierte UHRF1‑Expression ist häufig mit veränderten epigenetischen Zuständen verbunden, wie sie in proliferativen und transformierten Zellphänotypen beobachtet werden, und ist daher relevant für die Untersuchung epigenetischer Deregulation in der Krebsbiologie und der entwicklungsabhängigen Genregulation.

UHRF1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente UHRF1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

UHRF1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der UHRF1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen UHRF1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen UHRF1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.