UGT2B17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-405611-KO-2

Descripción general

UGT2B17 codifica una UDP‑glucuronosiltransferasa que cataliza la glucuronidación de fase II de diversos sustratos endógenos y xenobióticos, aumentando su solubilidad y favoreciendo su eliminación. Esta enzima contribuye a la homeostasis de las hormonas esteroideas y de los ácidos biliares, y puede modular la exposición celular a metabolitos bioactivos y potencialmente tóxicos mediante el metabolismo hepático y extrahepático. Las variaciones en la expresión o en el número de copias de UGT2B17 se han vinculado con diferencias interindividuales en la conjugación de andrógenos y en fenotipos de metabolismo de fármacos, con implicaciones para la biología relacionada con el sistema endocrino y la investigación farmacogenómica. En sistemas experimentales, la actividad de UGT2B17 se integra con redes de desintoxicación e influye en respuestas de señalización impulsadas por metabolitos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO UGT2B17 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UGT2B17 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UGT2B17 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UGT2B17 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UGT2B17.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UGT2B17 para la investigación de la señalización de UGT2B17, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de UGT2B17 críticos para la función de UGT2B17
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UGT2B17 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido UGT2B17 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido UGT2B17 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UGT2B17. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UGT2B17 (h) y el plásmido HDR UGT2B17 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UGT2B17 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UGT2B17 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.