Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UFD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423598
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- UFD1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico UFD1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UFD1 Anticuerpo (B-7): sc-377265
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
UFD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423598 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ufd1l codifica UFD1, un componente central del complejo segregasa UFD1–NPL4–VCP/p97 que reconoce y extrae sustratos poliubiquitinados para su procesamiento posterior por el sistema ubiquitina–proteasoma. Al acoplar la señalización por ubiquitina con la remodelación proteica dependiente de ATP, UFD1 contribuye a la degradación asociada al retículo endoplásmico (ERAD), al control de calidad de proteínas mal plegadas y al mantenimiento de la proteostasis bajo estrés celular. Esta vía también se conecta con la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la regulación de programas de transcripción mediante la degradación controlada de reguladores clave. La desregulación de cofactores de p97 y de componentes de ERAD se ha asociado con fenotipos de estrés proteotóxico y con contextos de neurodegeneración y biología del desarrollo, lo que convierte a Ufd1l en un nodo útil para estudios mecanísticos en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO UFD1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ufd1l en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ufd1l junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ufd1l tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UFD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ufd1l para la investigación de la señalización de UFD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ufd1l críticos para la función de UFD1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ufd1l para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido UFD1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido UFD1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ufd1l. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UFD1 (m) y el plásmido HDR UFD1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ufd1l para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ufd1l definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.