UBXN2B Double Nickase Plasmid (h): sc-407871-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das UBXN2B Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- UBXN2B Double-Nickase-Plasmid (h) und UBXN2B Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf UBXN2B abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
UBXN2B Double Nickase Plasmid (h) | sc-407871-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBXN2B Double Nickase Plasmid (h2) | sc-407871-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBXN2B (Ubiquitin-regulatorisches X-Domänen-enthaltendes Protein 2B) ist ein Adapterprotein mit UBX-Domäne, das an der ubiquitinabhängigen Proteinkontrolle und dem Umbau von Proteinkomplexen beteiligt ist. Über Interaktionen mit AAA-ATPasen wie VCP/p97 kann UBXN2B die ER-assoziierte Degradation (ERAD), die Proteostase sowie stressadaptive Signalwege beeinflussen, die mit der Beseitigung fehlgefalteter Proteine verknüpft sind. Diese Prozesse überschneiden sich mit der Regulation des Zellzyklus, Apoptose und Entzündungsreaktionen, wodurch UBXN2B ein relevanter Knotenpunkt für die Untersuchung von Signalwegen ist, die bei Neurodegeneration, in der Krebsbiologie und anderen proteostaseassoziierten Erkrankungen gestört sind. Eine funktionelle Störung von UBXN2B beim Menschen kann daher genutzt werden, um zu analysieren, wie ubiquitinvermittelter Proteinumsatz Signalnetzwerke und die zelluläre Homöostase formt.
UBXN2B Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des UBXN2B-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von UBXN2B abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die UBXN2B-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit UBXN2B-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.