Plásmido Doble Nickase (h) UBE2B: sc-404361-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)UBE2B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa UBE2B (h) y el plásmido de doble nickasa UBE2B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a UBE2B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) UBE2B | sc-404361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) UBE2B | sc-404361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2B codifica una enzima E2 conjugadora de ubiquitina (UbcH2) que cataliza la transferencia de ubiquitina desde E1 hacia ligasas E3, modulando la ubiquitinación de sustratos y la proteostasis. Participa en vías de respuesta al daño en el ADN y de mantenimiento del genoma, incluida la regulación dependiente de ubiquitina de la señalización de reparación y de procesos asociados a la cromatina. En la línea germinal, UBE2B tiene funciones establecidas en la espermatogénesis mediante el recambio de proteínas mediado por ubiquitina, vinculando su actividad con la progresión meiótica y fenotipos asociados a la fertilidad. La ubiquitinación desregulada en redes asociadas a UBE2B se ha estudiado en contextos de inestabilidad genómica y respuestas al estrés alteradas, relevantes para la biología del cáncer y otros trastornos proliferativos.
UBE2B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus UBE2B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de UBE2B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de UBE2B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con UBE2B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.