Plasmide Double Nickase (h) U11/U12 snRNP 20K: sc-409456-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) U11/U12 snRNP 20K correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide U11/U12 snRNP 20K Double Nickase (h) et le plasmide U11/U12 snRNP 20K Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZMAT5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) U11/U12 snRNP 20K | sc-409456-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZMAT5 code la protéine U11/U12 snRNP 20K, un composant essentiel du spliceosome mineur (dépendant de l’U12) qui participe à la reconnaissance et au traitement des introns de type U12. Par son rôle dans l’épissage des pré-ARNm et l’assemblage du spliceosome, U11/U12 snRNP 20K contribue au maintien de la fidélité des transcrits pour des gènes enrichis dans la signalisation, la réparation de l’ADN et la régulation du cycle cellulaire. Une perturbation du fonctionnement du spliceosome mineur peut modifier l’équilibre des isoformes et déclencher des changements étendus des programmes d’expression génique liés à la différenciation et aux réponses au stress. En conséquence, ZMAT5 est pertinent pour l’étude de la dérégulation de l’épissage observée dans certaines maladies génétiques et dans des phénotypes de traitement de l’ARN associés au cancer.
U11/U12 snRNP 20K Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZMAT5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZMAT5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZMAT5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZMAT5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.