Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TRMT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410018
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TRMT1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TRMT1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TRMT1 Anticuerpo (G-3): sc-373687
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TRMT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410018 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TRMT1 codifica la metiltransferasa de ARNt 1, una enzima modificadora de ARN que cataliza la formación de N2,N2-dimetilguanosina (m2,2G) en la posición 26 de múltiples ARNt citosólicos. Esta modificación favorece el plegamiento adecuado del ARNt y la precisión en la decodificación, influyendo así en la eficiencia global de la traducción y en la proteostasis. La actividad de TRMT1 vincula la regulación epitranscriptómica del ARN con las respuestas celulares al estrés, con efectos posteriores sobre los programas de síntesis proteica durante el crecimiento y la diferenciación. La alteración de la función de TRMT1 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo, lo que la convierte en un objetivo útil para dilucidar cómo la dinámica de las modificaciones del ARNt moldea la expresión génica neuronal y la adaptación al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRMT1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRMT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRMT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRMT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRMT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRMT1 para la investigación de la señalización de TRMT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TRMT1 críticos para la función de TRMT1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRMT1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TRMT1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRMT1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRMT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRMT1 (h) y el plásmido HDR TRMT1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRMT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRMT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.