TRIM44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412330

概要

TRIM44（tripartite motif containing 44）は、ユビキチン依存的なタンパク質安定性およびシグナル出力の制御に関与するとされるTRIMファミリータンパク質をコードします。多くのTRIM系E3リガーゼと比べてドメイン構成が非典型的であるものの、TRIM44はプロテオスタシスネットワークやストレス応答性シグナルの調節に関連づけられており、細胞増殖、生存、運動性などの過程に影響を与えます。TRIM44発現の異常は複数の腫瘍タイプで報告されており、しばしば浸潤性表現型の増強や、PI3K/AKTおよびNF-κB関連シグナルを含む経路活性の変化と関連しています。これらの特性により、TRIM44はユビキチン連関制御、経路間クロストーク、ならびに状況依存的ながん原性シグナル伝達の機構研究に有用な標的となります。

TRIM44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRIM44遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRIM44内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRIM44のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRIM44タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRIM44シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRIM44欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRIM44の機能に不可欠なTRIM44エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRIM44ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRIM44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRIM44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRIM44遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRIM44 HDRプラスミド（h）および TRIM44 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRIM44ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRIM44標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。