TREM-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425490

Descripción general

El receptor desencadenante expresado en células mieloides 1 (TREM-1) es un inmunorreceptor que se encuentra predominantemente en neutrófilos y monocitos/macrófagos y que amplifica las respuestas inflamatorias iniciadas por los receptores de reconocimiento de patrones. En el ratón, la señalización de TREM-1 se integra con vías mediadas por adaptadores para potenciar la activación de NF-κB y MAPK, aumentando la producción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias y reforzando las funciones efectoras de la inmunidad innata. La actividad de Trem1 está estrechamente vinculada al reclutamiento y la activación de células mieloides, así como a la comunicación con los compartimentos endotelial y estromal durante la inflamación aguda y crónica. La desregulación de la señalización de TREM-1 se ha asociado con modelos de enfermedades inflamatorias e infecciosas, así como con fenotipos mieloides asociados a tumores y con vías de daño tisular impulsadas por respuestas excesivas de citocinas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TREM-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Trem1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Trem1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Trem1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TREM-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Trem1 para la investigación de la señalización de TREM-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Trem1 críticos para la función de TREM-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Trem1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TREM-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TREM-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Trem1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TREM-1 (m) y el plásmido HDR TREM-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Trem1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Trem1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.