TRAPPC10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406491

Übersicht

TRAPPC10 kodiert eine zentrale Untereinheit des TRAPP‑(Transport Protein Particle)‑Komplexes, der das Andocken von Vesikeln sowie den Membrantransport im frühen sekretorischen und endomembranären System unterstützt. Über seine Rolle bei der Koordination des vesikulären Transports und der Golgi-/ER-assoziierten Transport‑Schritte trägt TRAPPC10 zur intrazellulären Proteinsortierung, zur Homöostase von Organellen und zur Frachtzustellung bei, die für eine normale Zellphysiologie erforderlich sind. Störungen von Komponenten des TRAPP‑Komplexes können den Durchsatz des sekretorischen Weges und Stressantworten beeinträchtigen, wodurch TRAPPC10 für mechanistische Studien zu transportabhängiger Signalgebung und zellulären Erhaltungsprogrammen relevant ist. Veränderte Vesikeltransporte werden zudem mit neuroentwicklungsbedingten und neurodegenerativen Phänotypen in Verbindung gebracht, was TRAPPC10 zu einem geeigneten Ziel für die Modellierung transportassoziierter Krankheitsmechanismen in menschlichen Zellen macht.

Das TRAPPC10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TRAPPC10-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TRAPPC10-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TRAPPC10 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TRAPPC10-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TRAPPC10-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TRAPPC10-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TRAPPC10-Exone abzielen, die für die TRAPPC10-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TRAPPC10-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TRAPPC10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TRAPPC10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TRAPPC10-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TRAPPC10 HDR-Plasmid (h) und TRAPPC10 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TRAPPC10-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TRAPPC10-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.