TRAF7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404992

Descripción general

TRAF7 codifica una ligasa E3 de ubiquitina y una proteína adaptadora de la familia de factores asociados al receptor de TNF, que integra la señalización proximal al receptor con el control dependiente de ubiquitina de la estabilidad proteica. TRAF7 regula múltiples vías de estrés e inflamatorias, incluidas las de señalización MAPK y NF-κB, e influye en la apoptosis, la organización del citoesqueleto y la polaridad celular mediante la ubiquitinación de componentes clave de la señalización. Se ha informado de actividad desregulada de TRAF7 y de mutaciones recurrentes en TRAF7 en varios contextos tumorales, lo que respalda su participación en la señalización oncogénica, el control transcripcional y las respuestas del microambiente. Como nodo de vía, TRAF7 se estudia con frecuencia en proteostasis, transducción de señales y control del crecimiento dependiente del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRAF7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRAF7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRAF7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRAF7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRAF7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRAF7 para la investigación de la señalización de TRAF7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TRAF7 críticos para la función de TRAF7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRAF7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRAF7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRAF7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRAF7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRAF7 (h) y el plásmido HDR TRAF7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRAF7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRAF7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.