TRAF4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423495

Descripción general

El factor asociado al receptor del factor de necrosis tumoral 4 (TRAF4), codificado por el gen murino *Traf4*, es una proteína adaptadora y una ligasa E3 de ubiquitina que acopla la señalización proximal al receptor con redes posteriores de quinasas y de regulación transcripcional. TRAF4 participa en la regulación de la señalización de NF-κB y MAPK y se ha relacionado con la dinámica del citoesqueleto, la polaridad celular y procesos vinculados a la barrera epitelial mediante interacciones dependientes del contexto con complejos de membrana y de uniones celulares. En compartimentos inmunitarios y epiteliales, la actividad de *Traf4* puede influir en la magnitud de la señalización inflamatoria y en las respuestas al estrés celular. Se han estudiado vías desreguladas asociadas a TRAF4 en relación con la biología tumoral, la remodelación tisular y los mecanismos de enfermedades inflamatorias, lo que convierte a *Traf4* en un objetivo útil para el análisis de vías en modelos murinos y sistemas celulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRAF4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Traf4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Traf4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Traf4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRAF4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Traf4 para la investigación de la señalización de TRAF4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Traf4 críticos para la función de TRAF4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Traf4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRAF4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TRAF4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Traf4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRAF4 (m) y el plásmido HDR TRAF4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Traf4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Traf4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.