TRAF2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400361-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TRAF2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TRAF2 Double Nickase Plasmid (h) e il TRAF2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TRAF2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TRAF2 Antibody (F-2): sc-136999
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TRAF2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRAF2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRAF2 (fattore associato al recettore del TNF 2) è una proteina adattatrice e una ligasi E3 dell’ubiquitina che collega la segnalazione della superfamiglia dei recettori del TNF a valle a vie trascrizionali e di risposta allo stress. Attraverso interazioni con motivi di legame per TRAF e la regolazione dell’ubiquitinazione legata a K63, TRAF2 contribuisce a coordinare l’attivazione delle cascate NF-κB e MAPK, modulando le risposte citochiniche, la resistenza all’apoptosi e l’omeostasi cellulare. La sua attività si integra con complessi di segnalazione dipendenti da RIPK1 e influenza il cross-talk tra la segnalazione infiammatoria e i programmi di morte cellulare. Una segnalazione di TRAF2 deregolata è stata implicata in alterazioni della regolazione immunitaria e nel rimodellamento di vie oncogeniche, rendendola un nodo utile per studi meccanicistici di fenotipi associati all’infiammazione.
TRAF2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TRAF2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TRAF2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TRAF2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TRAF2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.