TR4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423490

Descripción general

Nr2c2 codifica el receptor nuclear huérfano TR4 (receptor testicular 4), un factor de transcripción independiente de ligando que se une a elementos de respuesta hormonal para regular programas génicos implicados en el desarrollo, el metabolismo y las decisiones de destino celular. En sistemas murinos, TR4 se integra en redes de señalización de receptores nucleares e influye en el control transcripcional de la homeostasis de lípidos y glucosa, la función mitocondrial y los procesos de diferenciación en contextos reproductivos, neuronales e inmunitarios. La actividad de TR4 se ha relacionado con la modulación de la señalización inflamatoria y de las respuestas al estrés celular mediante amplios efectos transcripcionales, lo que convierte a Nr2c2 en un nodo útil para estudiar la comunicación cruzada entre vías. La desregulación de la expresión génica asociada a TR4 se ha investigado en modelos de disfunción metabólica, neurobiología y fenotipos oncogénicos, lo que respalda su relevancia para la investigación mecanística sin implicar resultados clínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TR4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nr2c2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nr2c2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nr2c2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TR4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nr2c2 para la investigación de la señalización de TR4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nr2c2 críticos para la función de TR4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nr2c2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TR4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TR4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nr2c2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TR4 (m) y el plásmido HDR TR4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nr2c2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nr2c2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.