Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
TPX2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402581
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TPX2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico TPX2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TPX2 Antibody (E-2): sc-271570
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TPX2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-402581 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
TPX2 (targeting protein for Xklp2) codifica una proteina associata ai microtubuli essenziale per l’assemblaggio e il mantenimento del fuso mitotico, inclusi la nucleazione dei microtubuli attorno ai cromosomi dipendente da Ran-GTP e l’attivazione/localizzazione della chinasi Aurora A ai poli del fuso. TPX2 sostiene l’integrità del centrosoma, la formazione delle fibre del cinetocore e la corretta segregazione cromosomica, collegandosi così ai processi di progressione del ciclo cellulare e alle vie della stabilità genomica. Un’espressione deregolata di TPX2 è frequentemente associata a fenotipi proliferativi e instabilità cromosomica in contesti oncologici, rendendola un marcatore ampiamente utilizzato e un nodo meccanicistico negli studi di segnalazione mitotica. TPX2 umano è quindi rilevante per indagare la funzione del checkpoint del fuso, l’aneuploidia e i meccanismi di vulnerabilità guidati dalla mitosi nei modelli di ricerca biomedica.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TPX2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TPX2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TPX2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TPX2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TPX2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TPX2 per lo studio della segnalazione di TPX2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni TPX2 critici per la funzione di TPX2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TPX2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal TPX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TPX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TPX2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal TPX2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TPX2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TPX2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TPX2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.