TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-427155

Übersicht

Trp53inp2 kodiert TP53INP2, ein stressinduzierbares nukleäres und zytoplasmatisches Protein, das an der Regulation der Autophagie sowie transkriptioneller Programme beteiligt ist, die mit der zellulären Homöostase verknüpft sind. Berichten zufolge wirkt TP53INP2 über Interaktionen mit Komponenten der Autophagie-Maschinerie an der Bildung und dem Transport von Autophagosomen mit und unterstützt damit Nährstoffsensorik- sowie Organell-Qualitätskontrollwege. In Mausmodellen und Zellsystemen wird die Aktivität von TP53INP2 häufig im Kontext metabolischer Anpassung, zellulärer Überlebensentscheidungen und Reaktionen auf oxidativen oder genotoxischen Stress untersucht. Eine Fehlregulation der mit TP53INP2 assoziierten Autophagie- und Stress-Signalwege ist für Studien zur Tumorbiologie, zu Entzündungszuständen und zu neurodegenerativen Prozessen relevant, bei denen eine gestörte Proteostase ein zentrales Merkmal ist.

Das TP53INP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Trp53inp2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Trp53inp2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Trp53inp2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TP53INP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Trp53inp2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TP53INP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Trp53inp2-Exone abzielen, die für die TP53INP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Trp53inp2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TP53INP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom TP53INP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Trp53inp2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TP53INP2 HDR-Plasmid (m) und TP53INP2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Trp53inp2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Trp53inp2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.