Plasmide CRISPR/Cas9 KO TNP2 (m): sc-423464
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TNP2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TNP2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TNP2 Antibody (B-2): sc-393843
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TNP2 (m) | sc-423464 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tnp2 code la protéine de transition 2 (TNP2), un facteur de remodelage de la chromatine spécifique des spermatozoïdes qui remplace les histones au cours des stades tardifs de la spermiogenèse et facilite l’incorporation ultérieure des protamines, assurant une compaction stable de l’ADN. Cette protéine participe au programme coordonné d’échange histones‑protamines, contribuant à la condensation nucléaire, à l’intégrité du génome et à une morphologie correcte de la tête des spermatozoïdes. La perturbation de Tnp2 dérègle la dynamique d’empaquetage de la chromatine et peut entraîner une maturation spermatique altérée ainsi qu’une baisse de la fertilité mâle. En tant que modèle, la TNP2 murine est largement utilisée pour étudier la reprogrammation épigénétique, l’extinction transcriptionnelle post‑méiotique et la régulation de l’architecture de la chromatine dans les cellules germinales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TNP2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tnp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tnp2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tnp2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TNP2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tnp2 pour l'étude de la signalisation de TNP2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tnp2 essentiels à la fonction de TNP2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tnp2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TNP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TNP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tnp2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TNP2 plasmide HDR (m) et le TNP2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tnp2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tnp2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.