TMEM125 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414318

Descripción general

TMEM125 codifica una proteína transmembrana de múltiples pasos con funciones emergentes en la organización de membranas y el tráfico intracelular, procesos que influyen en el recambio de receptores y en la señalización compartimentalizada. Se ha descrito su expresión en múltiples tejidos, y se ha observado una desregulación a nivel de transcritos en varios conjuntos de datos de enfermedades, lo que sugiere una posible relevancia para la homeostasis celular bajo estrés. Aunque la anotación mecanística sigue siendo limitada, TMEM125 se evalúa con frecuencia en estudios de genómica funcional centrados en vías próximas a la membrana, dinámica de orgánulos y proteostasis. Estas características hacen de TMEM125 un objetivo útil para analizar cómo las proteínas de membrana moldean las redes de señalización y las transiciones de estado celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMEM125 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMEM125 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMEM125 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMEM125 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMEM125.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMEM125 para la investigación de la señalización de TMEM125, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMEM125 críticos para la función de TMEM125
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMEM125 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMEM125 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMEM125 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMEM125. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMEM125 (h) y el plásmido HDR TMEM125 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMEM125 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMEM125 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.