TMED9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407215

Descripción general

TMED9 (miembro 9 de la familia p24) codifica un receptor de carga transmembrana de tipo I de la familia p24/TMED que se localiza predominantemente en la vía secretora temprana. TMED9 participa en el transporte vesicular dependiente de COPI y COPII, favoreciendo la selección de la carga y el tráfico entre el retículo endoplásmico, el compartimento intermedio RE–Golgi y el aparato de Golgi, y contribuye a la homeostasis de los orgánulos y al control de calidad de las proteínas. A través de estas funciones, TMED9 influye en la dinámica de la secreción y en la distribución intracelular de proteínas de membrana y secretadas, procesos estrechamente vinculados a las respuestas al estrés del RE y a la proteostasis. La desregulación del tráfico secretor y del transporte RE–Golgi se ha implicado en diversas enfermedades humanas, incluido el remodelado de la secreción asociado al cáncer y las vías de adaptación al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TMED9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TMED9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TMED9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TMED9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TMED9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TMED9 para la investigación de la señalización de TMED9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TMED9 críticos para la función de TMED9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TMED9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TMED9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TMED9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TMED9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TMED9 (h) y el plásmido HDR TMED9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TMED9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TMED9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.