TM4SF19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406884

Descripción general

TM4SF19 (miembro 19 de la familia transmembrana 4 L seis) codifica una proteína de membrana tipo tetraspanina que, según se predice, organiza microdominios de membrana y modula las interacciones célula–célula o célula–matriz. Como miembro de la familia TM4SF, TM4SF19 se asocia con procesos como el agrupamiento de receptores, la transducción de señales en la membrana plasmática y la regulación de vías relacionadas con la adhesión que influyen en la migración y la organización epitelial. Se han descrito alteraciones en la expresión de proteínas TM4SF en múltiples contextos de cáncer, lo que respalda la investigación de TM4SF19 en la biología tumoral, los fenotipos de invasión y la señalización del microambiente. Los estudios de perturbación de TM4SF19 también pueden aportar información sobre los mecanismos de tráfico de proteínas de membrana y la composición del “surfaceoma” en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TM4SF19 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TM4SF19 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TM4SF19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TM4SF19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TM4SF19.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TM4SF19 para la investigación de la señalización de TM4SF19, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TM4SF19 críticos para la función de TM4SF19
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TM4SF19 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TM4SF19 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TM4SF19 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TM4SF19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TM4SF19 (h) y el plásmido HDR TM4SF19 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TM4SF19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TM4SF19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.