Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) TIP120A: sc-402506-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TIP120A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TIP120A Double Nickase (h) et le plasmide TIP120A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CAND1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TIP120A Antibody (G-3): sc-137055
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TIP120A | sc-402506-NIC | 20 µg | $410.00 |
CAND1 (TIP120A) code un régulateur des ligases ubiquitine culline-RING (CRL) qui se lie aux cullines non neddylées et favorise l’échange des modules récepteurs de substrat, contrôlant ainsi l’assemblage et le remodelage des CRL. Par cette activité, TIP120A coordonne la protéostasie dépendante de l’ubiquitine et influence la progression du cycle cellulaire, les réponses au stress de réplication de l’ADN et le renouvellement dépendant des signaux de protéines régulatrices clés. Une dérégulation de la dynamique des CRL et de l’équilibre neddylation/déneddylation a été associée à une instabilité génomique et à un contrôle de la croissance altéré, faisant de CAND1 un nœud pertinent dans des voies fréquemment perturbées en biologie du cancer. La fonction de TIP120A est également étudiée dans le contexte du contrôle qualité dépendant du protéasome et de l’adaptation au stress, où la sélection des substrats par les CRL façonne les phénotypes cellulaires.
TIP120A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CAND1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CAND1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CAND1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CAND1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.