Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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tetranectin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423429
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- tetranectin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico tetranectin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: tetranectin Anticuerpo (F-8): sc-376940
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
tetranectin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423429 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Clec3b** codifica la **tetranectina**, una proteína secretada tipo lectina C que se encuentra en fluidos extracelulares y en compartimentos asociados a la matriz extracelular. La tetranectina se une al **plasminógeno** y se ha relacionado con la regulación de la **proteólisis pericelular**, la **fibrinólisis** y la **remodelación de la matriz extracelular**, procesos que influyen en la migración celular y la reparación tisular. A través de sus interacciones con sistemas de proteasas y componentes de la matriz, la tetranectina puede modular los microambientes inflamatorios y estromales, y se ha estudiado en el contexto de la invasión tumoral, la cicatrización de heridas y la remodelación fibrótica. Se han descrito alteraciones en la expresión de **CLEC3B** o en la abundancia de su proteína en múltiples enfermedades, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico para investigar el equilibrio proteolítico y la dinámica de la matriz.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO tetranectin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Clec3b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Clec3b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Clec3b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína tetranectin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Clec3b para la investigación de la señalización de tetranectin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Clec3b críticos para la función de tetranectin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Clec3b para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido tetranectin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido tetranectin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Clec3b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR tetranectin (m) y el plásmido HDR tetranectin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Clec3b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Clec3b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.