TETRAN Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411436

Descripción general

MFSD10 codifica TETRAN, una proteína de membrana multipaso que se cree participa en procesos relacionados con el transporte de solutos y la homeostasis de membrana, en consonancia con su pertenencia a la superfamilia de los facilitadores mayores (major facilitator superfamily). Como presunto factor de tipo transportador, TETRAN resulta de interés para estudios de tráfico del sistema endomembranoso, función de orgánulos y adaptación metabólica celular, donde los cambios en el flujo de moléculas pequeñas pueden modular la señalización de estrés y los programas transcripcionales posteriores. Se ha informado de una expresión alterada de MFSD10 en conjuntos de datos transcriptómicos en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda investigar su contribución al metabolismo desregulado y a las transiciones de estado celular. Definir la función de TETRAN puede ayudar a aclarar cómo las redes de transporte de membrana influyen en fenotipos de proliferación, supervivencia y diferenciación en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TETRAN (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MFSD10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MFSD10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MFSD10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TETRAN.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MFSD10 para la investigación de la señalización de TETRAN, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MFSD10 críticos para la función de TETRAN
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MFSD10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TETRAN CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TETRAN CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MFSD10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TETRAN (h) y el plásmido HDR TETRAN (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MFSD10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MFSD10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.