Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Tctex2 (m): sc-423317
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Tctex2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Tctex2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Tctex2 Antibody (H-5): sc-74541
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Tctex2 (m) | sc-423317 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tcte3 code pour Tctex2, une protéine associée aux chaînes légères de la dynéine, impliquée dans les processus de transport dépendants des microtubules qui soutiennent la polarisation et la motilité cellulaires. Chez la souris, Tctex2 est surtout liée à la fonction des cils et des flagelles, où le mouvement entraîné par la dynéine et le trafic de cargos sont essentiels à la dynamique de l’axonème et à la motilité des spermatozoïdes. La perturbation des composants accessoires de la dynéine peut altérer la ciliogenèse, le transport intraflagellaire et l’organisation liée au centrosome, avec des effets mesurables sur la signalisation cellulaire et la mise en place des patrons de développement. Par conséquent, Tcte3/Tctex2 est pertinente pour la recherche sur les phénotypes associés aux cils, les modèles d’infertilité masculine et les mécanismes reliant le transport cytosquelettique à l’homéostasie tissulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Tctex2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tcte3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tcte3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tcte3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Tctex2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tcte3 pour l'étude de la signalisation de Tctex2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tcte3 essentiels à la fonction de Tctex2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tcte3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Tctex2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Tctex2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tcte3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Tctex2 plasmide HDR (m) et le Tctex2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tcte3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tcte3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.