TBL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407010

Übersicht

TBL2 (Transducin Beta-like 2) ist ein mit dem endoplasmatischen Retikulum (ER) assoziiertes Protein, das an membrannahen Signalprozessen und der Proteostase beteiligt ist; beschrieben wurden u. a. Funktionen bei der Regulation zellulärer Stressantworten und der Kontrolle der Translation. Durch die Verknüpfung der ER-Homöostase mit Signalnetzwerken wird TBL2 in Kontexten untersucht, in denen der Umgang mit fehlgefalteten Proteinen, die Lipid- und Membranbiologie sowie adaptive Stresswege Zellschicksalsentscheidungen beeinflussen. Eine veränderte Regulation von ER-Stress und damit zusammenhängender metabolischer Signalgebung wurde mit entzündlichen und metabolischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was TBL2 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien dieser Prozesse macht. In humanen Zellmodellen ermöglicht die Störung von TBL2 die Untersuchung, wie ER-gekoppelte Signalknoten die Signalweg-Ausgabe unter Nährstoff-, oxidativem oder proteotoxischem Stress prägen.

Das TBL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TBL2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TBL2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TBL2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TBL2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TBL2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TBL2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TBL2-Exone abzielen, die für die TBL2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TBL2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TBL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TBL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TBL2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TBL2 HDR-Plasmid (h) und TBL2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TBL2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TBL2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.