Plásmido Doble Nickase (m) TAL2: sc-423262-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TAL2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TAL2 (m) y el plásmido de doble nickasa TAL2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tal2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TAL2 | sc-423262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) TAL2 | sc-423262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Tal2 de ratón codifica TAL2, un factor de transcripción básico hélice-bucle-hélice (bHLH) que participa en programas de regulación génica al asociarse con otras proteínas bHLH y unirse a elementos que contienen cajas E para influir en la especificación de linajes y la diferenciación celular. La actividad de TAL2 se vincula a redes de control transcripcional que moldean procesos del desarrollo hematopoyético y neural, en los que se requiere una regulación precisa de la expresión de genes diana para una maduración normal. La desregulación de los circuitos transcripcionales de la familia TAL se ha implicado en proliferación aberrante y estados de diferenciación alterados en modelos de neoplasias hematológicas, lo que convierte a Tal2 en un locus útil para explorar dependencias oncogénicas de factores de transcripción. El estudio de Tal2 en sistemas murinos permite el análisis mecanístico de las vías transcripcionales impulsadas por bHLH, los efectos del contexto de la cromatina y los programas de expresión génica posteriores.
TAL2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tal2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tal2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tal2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tal2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.