Plasmide Double Nickase (m) TACE/ADAM17: sc-418985-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TACE/ADAM17 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TACE/ADAM17 Double Nickase (m) et le plasmide TACE/ADAM17 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Adam17. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TACE/ADAM17 | sc-418985-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Adam17** code la métalloprotéase transmembranaire **TACE/ADAM17**, une sheddase majeure qui libère des ectodomaines solubles de cytokines, de facteurs de croissance et de récepteurs. En clivant des substrats tels que le pro‑TNF, des ligands de l’EGFR et certaines molécules d’adhérence, ADAM17 fait le lien entre la signalisation inflammatoire et des voies associées à **EGFR/MAPK** et **NF‑κB**, modulant la communication cellulaire, la prolifération et les réponses au stress. Son activité recoupe des processus de protéolyse intramembranaire régulée et de trafic membranaire qui contrôlent la disponibilité des récepteurs et l’amplitude de la signalisation en aval. Un shedding dérégulé dépendant d’ADAM17 a été impliqué dans des modèles expérimentaux de maladies inflammatoires, de remodelage tissulaire et de réseaux de signalisation liés au cancer, ce qui motive des études mécanistiques dans les systèmes immunitaires et épithéliaux.
TACE/ADAM17 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Adam17 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Adam17. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Adam17. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Adam17.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.