Plasmide Double Nickase (h) T2R38: sc-402279-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) T2R38 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide T2R38 Double Nickase (h) et le plasmide T2R38 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TAS2R38. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) T2R38 | sc-402279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) T2R38 | sc-402279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **TAS2R38** code le récepteur du goût amer **T2R38**, un RCPG (récepteur couplé aux protéines G) de classe A surtout connu pour détecter des composés contenant des thiourées et déclencher une signalisation RCPG canonique via des protéines G hétérotrimériques, la modulation de seconds messagers et des programmes transcriptionnels en aval dépendant des MAPK. Au-delà de la gustation, l’expression de T2R38 dans les voies aériennes et d’autres contextes épithéliaux a été associée à une régulation chimiosensorielle des réponses innées de barrière, incluant des voies qui influencent l’activité ciliaire et la signalisation antimicrobienne. Des haplotypes fréquents de **TAS2R38** modifient la réactivité du récepteur et ont été étudiés en lien avec les différences interindividuelles de perception de l’amertume, le comportement alimentaire et les interactions hôte–environnement. Ces caractéristiques font de **TAS2R38** un modèle utile pour disséquer la spécificité des ligands des RCPG, la dynamique de transduction du signal et des phénotypes dépendants du génotype.
T2R38 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TAS2R38 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TAS2R38. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TAS2R38. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TAS2R38.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.