Plásmido Doble Nickase (h) T-type Ca++ CP α1G: sc-418331-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)T-type Ca++ CP α1G consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa T-type Ca++ CP α1G (h) y el plásmido de doble nickasa T-type Ca++ CP α1G (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CACNA1G. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) T-type Ca++ CP α1G | sc-418331-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) T-type Ca++ CP α1G | sc-418331-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1G codifica la subunidad formadora del poro CaV3.1 (α1G) de los canales de calcio tipo T dependientes de voltaje, que se activan a potenciales de membrana bajos para generar una entrada transitoria de Ca2+. Esta corriente sostiene la descarga rítmica, la actividad de ráfagas de rebote y la señalización dependiente de calcio que acopla la excitabilidad de la membrana con programas de expresión génica en células excitables y en algunas no excitables. La actividad de CaV3.1 interactúa con vías que regulan la homeostasis intracelular de Ca2+, las oscilaciones neuronales y el acoplamiento excitación–secreción, e influye en procesos como la progresión del ciclo celular y la diferenciación a través de efectores sensibles al calcio. La desregulación de la expresión de CACNA1G o de la función del canal se ha vinculado con cambios en la excitabilidad eléctrica y en la señalización de calcio en fenotipos neurológicos y cardiovasculares, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos de la biología de los canales iónicos.
T-type Ca++ CP α1G El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CACNA1G en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CACNA1G. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CACNA1G. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CACNA1G alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.