Plasmide Double Nickase (h) SYND4/SDC4/Syndecan-4: sc-400502-NIC

SDC4 code la syndécane‑4 (SYND4), un protéoglycane transmembranaire à héparane sulfate exprimé de manière ubiquitaire, qui agit comme co‑récepteur de composants de la matrice extracellulaire, de facteurs de croissance et de chimiokines. En coordonnant l’engagement des intégrines et la signalisation des facteurs de croissance, la syndécane‑4 régule l’assemblage des adhésions focales, le remodelage du cytosquelette d’actine et la migration cellulaire via des voies comprenant l’activation de PKCα et la modulation des GTPases de la famille Rho. Elle contribue à la mécanotransduction et à la communication cellule–matrice dans des processus tels que la réparation des plaies, l’inflammation et le remodelage vasculaire. Une expression dérégulée de SDC4 ou son clivage (shedding) ont été associés à un remodelage fibreux et à l’invasion tumorale, ce qui en fait une cible utile pour l’étude des réseaux de signalisation dépendants de l’adhésion.

SYND4/SDC4/Syndecan-4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SDC4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SDC4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SDC4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SDC4.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.