Plasmide Double Nickase (h) Superoxide Dismutase 2/SOD2: sc-400230-NIC

Le gène humain **SOD2** code la superoxyde dismutase mitochondriale au manganèse, une défense enzymatique majeure contre les radicaux superoxyde générés par la phosphorylation oxydative. En convertissant le superoxyde en peroxyde d’hydrogène, SOD2 contribue à maintenir l’homéostasie rédox mitochondriale, soutient le fonctionnement de la chaîne de transport d’électrons et limite les dommages oxydatifs à l’ADN mitochondrial, aux protéines et aux lipides. L’activité de SOD2 s’intègre aux voies antioxydantes et de réponse au stress, notamment la détoxification régulée par NRF2 et les processus de contrôle qualité mitochondrial tels que la mitophagie et la signalisation de l’apoptose. Une expression dérégulée de SOD2 ou une activité altérée est associée à des phénotypes de stress oxydatif observés dans le métabolisme tumoral, la neurodégénérescence, les cardiomyopathies et les troubles inflammatoires, ce qui en fait une cible fréquente des études mécanistiques sur la dysfonction mitochondriale.

Superoxide Dismutase 2/SOD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SOD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SOD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SOD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SOD2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.