Plasmide CRISPR/Cas9 KO SULT1C2 (h): sc-406300

Présentation

SULT1C2 code une sulfotransférase cytosolique qui catalyse le transfert d’un groupement sulfate depuis la 3′-phosphoadénosine-5′-phosphosulfate (PAPS) vers des substrats portant des fonctions hydroxyle ou amine, augmentant ainsi leur polarité et modulant leur biodisponibilité. En tant qu’élément du métabolisme de phase II, SULT1C2 participe à des processus de biotransformation des xénobiotiques et des endobiotiques qui influencent la gestion cellulaire des hormones, des substances chimiques environnementales et des composés alimentaires. Son activité s’insère dans des réseaux plus larges de détoxification et peut façonner des profils métaboliques ayant un impact sur les réponses au stress oxydant et sur le tonus de signalisation. Une capacité de sulfatation altérée a été associée à des différences interindividuelles de susceptibilité aux agents chimiques, et a été étudiée dans le contexte du métabolisme des carcinogènes et de phénotypes pertinents en toxicologie.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SULT1C2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SULT1C2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SULT1C2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SULT1C2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SULT1C2.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SULT1C2 pour l'étude de la signalisation de SULT1C2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SULT1C2 essentiels à la fonction de SULT1C2
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SULT1C2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SULT1C2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SULT1C2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SULT1C2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SULT1C2 plasmide HDR (h) et le SULT1C2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SULT1C2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SULT1C2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.