Plásmido Doble Nickase (h) Sulfiredoxin: sc-403023-NIC

SRXN1 codifica la sulfiredoxina, una reductasa dependiente de ATP que restaura las peroxirredoxinas 2-Cys sobreoxidadas desde el estado de ácido sulfínico, reactivando así la detoxificación de peróxidos mediada por peroxirredoxinas. A través de este ciclo de reparación, la sulfiredoxina ayuda a mantener la homeostasis redox celular y respalda procesos de señalización influidos por especies reactivas de oxígeno, incluidos programas de adaptación al estrés que se intersectan con vías antioxidantes reguladas por NRF2. La expresión alterada de SRXN1 se ha vinculado a fenotipos de estrés oxidativo y se ha descrito en distintos contextos, como la biología tumoral, la inflamación y la neurodegeneración, donde la función de las peroxirredoxinas y el amortiguamiento redox pueden moldear decisiones sobre el destino celular. En consecuencia, SRXN1 se estudia ampliamente por su papel en la regulación del metabolismo de peróxidos, la oxidación de proteínas y las redes de señalización sensibles al estado redox.

Sulfiredoxin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SRXN1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SRXN1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SRXN1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SRXN1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.