striatin Double Nickase Plasmid (h): sc-406215-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das striatin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- striatin Double-Nickase-Plasmid (h) und striatin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf STRN abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: striatin: sc-136084
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
striatin Double Nickase Plasmid (h) | sc-406215-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
striatin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-406215-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane STRN-Gen codiert Striatin, ein Calmodulin-bindendes Scaffold-Protein innerhalb des STRIPAK-Komplexes (striatin-interacting phosphatase and kinase), der PP2A-assoziierte Signalgebung, Kinase-Regulation sowie die Assemblierung von Multiproteinkomplexen an Zellmembranen und Zellkontaktstellen koordiniert. Über diese Interaktionen trägt Striatin zur Integration calciumabhängiger Signale mit Signalwegen bei, die die Zytoskelettdynamik, Zellpolarität, vesikulären Transport und proliferationsassoziierte Signalkaskaden steuern. Eine veränderte STRN/STRIPAK-Funktion wurde mit fehlregulierter Signaltransduktion und gestörter Organisation von Zellkontakten in Zusammenhängen in Verbindung gebracht, die für das onkogene Remodeling von Signalwegen und die gewebespezifische Homöostase relevant sind. Diese Eigenschaften machen STRN zu einem nützlichen Ziel, um scaffold-vermitteltes Crosstalk zwischen Signalwegen sowie das Gleichgewicht zwischen Phosphatase und Kinase in humanen Zellen zu untersuchen.
striatin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des STRN-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von STRN abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die STRN-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit STRN-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.