Stim1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401311-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- Stim1 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- Stim1 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo Stim1 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo Stim1 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor STIM1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: Stim1 Anticorpo (A-8): sc-166840
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Stim1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-401311-LAC | 200 µl | $455.00 |
O STIM1 humano codifica a molécula de interação estromal 1 (Stim1), um sensor de Ca²⁺ do retículo endoplasmático que deteta a depleção de Ca²⁺ no lúmen e se acopla aos canais ORAI para desencadear a entrada de cálcio operada por depleção dos depósitos (SOCE). Este eixo de sinalização molda a dinâmica do Ca²⁺ citosólico que controla a transcrição dependente de NFAT, a progressão do ciclo celular, a adaptação metabólica e a remodelação do citoesqueleto. A SOCE dependente de Stim1 é central para a ativação de células imunitárias e para processos mais amplos regulados por cálcio, e alterações na atividade de STIM1 têm sido associadas a disfunção imunitária e a outras patologias que envolvem sinalização de cálcio aberrante. Como regulador proximal do influxo de Ca²⁺, o STIM1 oferece um ponto de entrada mecanístico para dissecar vias dependentes de cálcio e respostas ao stress em células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais Stim1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de STIM1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais Stim1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição STIM1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Stim1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo STIM1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.