Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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STI1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423190
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- STI1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico STI1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: STI1 Anticuerpo (D-6): sc-390203
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
STI1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423190 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Stip1 codifica la proteína fosforilada inducible por estrés 1 (STI1, también conocida como HOP), una cochaperona que conecta HSP70 y HSP90 para coordinar el plegamiento, la maduración y la estabilización de proteínas de señalización. En células de ratón, STI1 favorece la proteostasis y contribuye a las respuestas celulares al choque térmico, el estrés oxidativo y otras agresiones proteotóxicas, influyendo en el control de calidad y el recambio de proteínas. Al modular el procesamiento de los clientes de las chaperonas, STI1 puede moldear vías que regulan la señalización de receptores y quinasas, la función mitocondrial y la dinámica del citoesqueleto. Las redes de chaperonas desreguladas en las que participa STI1 son relevantes en modelos de neurodegeneración, biología del cáncer y respuestas inflamatorias al estrés, donde la estabilidad alterada del proteoma y la señalización de estrés son rasgos comunes.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO STI1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stip1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stip1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stip1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína STI1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stip1 para la investigación de la señalización de STI1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Stip1 críticos para la función de STI1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stip1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido STI1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido STI1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stip1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR STI1 (m) y el plásmido HDR STI1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stip1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stip1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.