Plásmido CRISPR de Activación (h) ST8Sia III: sc-407120-ACT
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) ST8Sia III es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) ST8Sia III incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Los gRNA codificados por el plásmido de activación CRISPR ST8Sia III (h) y el plásmido de activación CRISPR ST8Sia III (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas situadas aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción de ST8SIA3. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido CRISPR de Activación (h) ST8Sia III | sc-407120-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (h2) ST8Sia III | sc-407120-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
ST8SIA3 codifica ST8Sia III, una α2,8-sialiltransferasa residente del aparato de Golgi que alarga cadenas de ácido siálico en glicoproteínas y glicolípidos para generar glicanos polisialilados. Al remodelar la glicosilación de la superficie celular y del espacio extracelular, ST8Sia III influye en la organización de la membrana, las interacciones de receptores y la comunicación célula–célula, con efectos posteriores sobre programas de adhesión, migración y diferenciación. Con frecuencia se observan firmas de sialilación alteradas en el cáncer y en la desregulación inmunitaria, y la expresión de ST8SIA3 se ha vinculado a cambios en la invasividad de las células tumorales y en fenotipos de señalización. Por lo tanto, este gen es relevante para estudios sobre la regulación dependiente de la glicosilación de vías del desarrollo y transiciones de estados celulares asociadas a enfermedad.
ST8Sia III El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de ST8SIA3 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.
ST8Sia III El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus ST8SIA3 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.
Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional ST8SIA3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de ST8Sia III. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo ST8SIA3 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de ST8Sia III en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía ST8Sia III en células tumorales con expresión de ST8SIA3 silenciada o reducida.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.