SSTR5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404199

Übersicht

Somatostatinrezeptor 5 (SSTR5) ist ein G‑Protein‑gekoppelter Rezeptor für Somatostatin, der überwiegend an Gi/o‑Proteine koppelt, um die Adenylylcyclase-Aktivität zu hemmen, intrazelluläres cAMP zu senken und die Signalübertragung über Ionenkanäle zu modulieren. Über nachgeschaltete Effekte auf MAPK/ERK und andere GPCR‑regulierte Signalwege beeinflusst SSTR5 je nach Zelltyp die Hormonausschüttung, Neurotransmission und Proliferationsprogramme. In menschlichen Geweben trägt SSTR5 zur endokrinen und metabolischen Regulation bei, einschließlich der Modulation der Insulin- und Wachstumshormonachsen-Signalgebung. Eine Fehlregulation der Somatostatinrezeptor-Signalübertragung wurde in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten mit veränderten Sekretionsphänotypen und proliferativem Verhalten in Verbindung gebracht, was SSTR5 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung von Signalwegen macht.

Das SSTR5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SSTR5-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SSTR5-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SSTR5 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SSTR5-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SSTR5-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SSTR5-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SSTR5-Exone abzielen, die für die SSTR5-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SSTR5-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SSTR5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SSTR5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SSTR5-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SSTR5 HDR-Plasmid (h) und SSTR5 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SSTR5-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SSTR5-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.