SSTR1 Double Nickase Plasmid (h): sc-403410-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SSTR1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SSTR1 Double-Nickase-Plasmid (h) und SSTR1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SSTR1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SSTR1: sc-293490
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SSTR1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403410-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SSTR1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403410-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SSTR1 kodiert den Somatostatinrezeptor 1, einen Gi/o-gekoppelten GPCR, der Somatostatinpeptide bindet, um die Adenylylcyclase-Aktivität zu hemmen, die cAMP-Produktion zu verringern und nachgeschaltete Effektoren wie die MAPK/ERK- und PI3K-Signalwege zu modulieren. Über diese Signalwege beeinflusst SSTR1 den Calciumfluss, die Aktivität von Ionenkanälen sowie Transkriptionsprogramme, die die neuronale Erregbarkeit, die endokrine Sekretion und die Zellzykluskontrolle regulieren. Die Rezeptorsignalisierung trägt zu koordinierten Rückkopplungsmechanismen in neuroendokrinen und gastrointestinalen Systemen bei, in denen der Somatostatin-Tonus die Hormonfreisetzung und die synaptische Übertragung prägt. Eine dysregulierte Expression oder Signalübertragung von Somatostatinrezeptoren wurde mit veränderter neuroendokriner Differenzierung und proliferativen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistisches Ziel in Studien zur Tumorbiologie sowie zur neuronalen/endokrinen Regulation unterstützt.
SSTR1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SSTR1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SSTR1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SSTR1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SSTR1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.