Particules Lentivirales d'Activation (h) SPT6: sc-406219-LAC

Le gène humain **SUPT6H** code **SPT6**, un facteur d’élongation transcriptionnelle conservé qui se lie à l’ARN polymérase II et coordonne le réassemblage des nucléosomes lors de la transcription active. SPT6 agit comme un chaperon d’histones et couple l’élongation au remodelage de la chromatine, contribuant à la régulation de la pause proximale au promoteur, du traitement co‑transcriptionnel des ARN et au maintien de la stabilité du génome. Par ses rôles dans l’organisation de la chromatine et la fidélité transcriptionnelle, une activité altérée de SPT6 peut perturber les programmes d’expression génique liés à l’identité cellulaire, à la prolifération et aux réponses au stress, faisant de SUPT6H un nœud pertinent pour l’étude de la dérégulation transcriptionnelle dans des voies associées aux maladies.

Les particules d'activation lentivirales SPT6 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SUPT6H dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales SPT6 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SUPT6H, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de SPT6. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SUPT6H ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.