Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SNX9 Plasmide Double Nickase (h): sc-403578-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SNX9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SNX9 Double Nickase Plasmid (h) e il SNX9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SNX9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SNX9 Antibody (G-5): sc-166863
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SNX9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403578-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SNX9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403578-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNX9 (sorting nexin 9) è un adattatore con dominio PX-BAR che collega il riconoscimento dei fosfoinositidi al rimodellamento della membrana e al traffico endocitico. Partecipa all’endocitosi mediata da clatrina e alla gemmazione delle vescicole coordinando il rilevamento della curvatura con il reclutamento di regolatori dell’actina e della dinamina durante la scissione delle vescicole. Attraverso queste funzioni, SNX9 influenza l’internalizzazione dei recettori, l’attenuazione del segnale e la dinamica del citoscheletro, processi rilevanti per la migrazione cellulare e le reti di segnalazione proliferativa. Alterazioni del traffico dipendente da SNX9 sono state studiate nel contesto della segnalazione oncogenica, della neurobiologia e delle vie di ingresso dei patogeni, in cui il controllo dell’endocitosi incide sull’omeostasi cellulare.
SNX9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SNX9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SNX9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SNX9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SNX9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.