Plásmido Doble Nickase (h) SMG5: sc-406989-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SMG5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SMG5 (h) y el plásmido de doble nickasa SMG5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SMG5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SMG5 | sc-406989-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SMG5 | sc-406989-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMG5 codifica un factor central conservado de la vía de degradación de ARNm mediada por codones sin sentido (NMD) que ayuda a eliminar transcritos que contienen codones de terminación prematuros y modula la estabilidad de determinados ARNm fisiológicos. SMG5 se asocia con UPF1 fosforilada y coopera con complejos que contienen PP2A para promover la desfosforilación de UPF1, coordinando la transición desde la vigilancia hasta la degradación del ARNm. A través de estas actividades, SMG5 contribuye al control de calidad del ARN dependiente de la traducción, a la proteostasis y a la regulación de programas de expresión génica durante las respuestas celulares al estrés. La desregulación de componentes de la NMD, incluido SMG5, se ha vinculado con alteraciones de la homeostasis del transcriptoma y con fenotipos relevantes para la neurobiología del desarrollo y la biología del cáncer, lo que convierte a SMG5 en un nodo útil para estudios mecanísticos de la vigilancia del ARN.
SMG5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SMG5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SMG5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SMG5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SMG5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.