Slfn11 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401137-LAC

Humanes SLFN11 kodiert Schlafen-Familienmitglied 11 (Slfn11), einen mit der DNA-Schadensantwort assoziierten Faktor, der die Toleranz gegenüber Replikationsstress und das Zellschicksal nach genotoxischer Schädigung beeinflusst. SLFN11 steht mit der Regulation stallender Replikationsgabeln, Transkriptions‑Replikations‑Konflikten und Checkpoint-Signalgebung in Verbindung und ist in Signalwege eingebunden, die den Verlauf der S‑Phase und die Genomintegrität prägen. Über Effekte auf chromatinassoziierte Prozesse und stressresponsive transkriptionelle Programme kann SLFN11 die zelluläre Empfindlichkeit gegenüber Wirkstoffen modulieren, die DNA-Läsionen erzeugen. Eine veränderte SLFN11-Expression oder -Funktion wurde im Kontext der Tumorbiologie sowie von Mechanismen untersucht, die Resistenzphänotypen in Forschungsmodellen mit DNA-Schadens-Targeting zugrunde liegen.

Slfn11 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SLFN11-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Slfn11 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SLFN11-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Slfn11-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SLFN11-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.