SLC35C1 Double Nickase Plasmid (h): sc-410008-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SLC35C1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SLC35C1 Double-Nickase-Plasmid (h) und SLC35C1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SLC35C1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SLC35C1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-410008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35C1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-410008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35C1 kodiert den im Golgi-Apparat lokaliserten GDP‑L‑Fucose-Transporter, der aktivierte Fucose für luminale Glykosyltransferasen bereitstellt und damit die Kernfucosylierung von N‑Glykanen sowie die Fucosylierung von Selektinliganden ermöglicht. Indem SLC35C1 die zelluläre Fucosylierungskapazität steuert, beeinflusst es die Adhäsion und das Trafficking von Leukozyten, die Zell‑Zell‑Erkennung sowie allgemein glykanabhängige Signalwege in sekretorischen und endozytischen Pfaden. Loss‑of‑function‑Varianten sind mit kongenitalen Störungen der Glykosylierung verbunden, die durch defekte Fucosylierung und immunologische Dysfunktion gekennzeichnet sind, wodurch SLC35C1 einen zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung der Regulation des Glykoms darstellt. Eine Störung von SLC35C1 wird daher häufig genutzt, um zu analysieren, wie der Transport von Nukleotidzuckern Adhäsion, entzündungsbezogene Signalgebung und die Reifung von Glykoproteinen in humanen Zellen prägt.
SLC35C1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SLC35C1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SLC35C1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SLC35C1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SLC35C1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.