Plásmido Doble Nickase (h) SLC35A3: sc-417814-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC35A3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC35A3 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC35A3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC35A3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC35A3 | sc-417814-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC35A3 | sc-417814-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A3 codifica un transportador de azúcares nucleotídicos asociado al aparato de Golgi y al retículo endoplásmico que importa UDP‑N‑acetilglucosamina al lumen para sostener la glicosilación N‑ligada, la glicosilación O‑ligada y la biosíntesis de glicolípidos. Al controlar la disponibilidad de sustratos para las glicosiltransferasas, SLC35A3 influye en el plegamiento y el tráfico de proteínas, así como en la composición de los glicanos de la superficie celular, que modulan la señalización de receptores y las interacciones célula‑célula. La alteración del transporte de UDP‑GlcNAc puede perturbar la proteostasis y las vías dependientes de glicanos, lo que vincula a SLC35A3 con trastornos congénitos de la glicosilación y con fenotipos más amplios que afectan al neurodesarrollo y a la homeostasis metabólica. Su papel central en el eje hexosamina/glicosilación también lo hace relevante para estudiar cómo el sensor de nutrientes se acopla al remodelado de glicanos en células humanas.
SLC35A3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC35A3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC35A3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC35A3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC35A3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.