SLAIN2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429242

Descripción general

Slain2 codifica SLAIN2, un regulador que se localiza en el extremo plus de los microtúbulos y coopera con proteínas EB y otros complejos +TIP para promover un crecimiento persistente de los microtúbulos, su captura en la corteza celular y una dinámica adecuada del huso mitótico. A través de su papel en la organización del tráfico dependiente de microtúbulos y de la polaridad celular, SLAIN2 contribuye a procesos como la progresión mitótica, el transporte intracelular y el crecimiento de neuritas. La alteración de las redes +TIP y de la estabilidad de los microtúbulos es ampliamente relevante para fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos, así como para la inestabilidad cromosómica en estados celulares proliferativos. Por ello, Slain2 en ratón sirve como un modelo manejable para investigar el control citoesquelético de la división y la diferenciación celular en sistemas de mamíferos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLAIN2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slain2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slain2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slain2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLAIN2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slain2 para la investigación de la señalización de SLAIN2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Slain2 críticos para la función de SLAIN2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slain2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLAIN2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SLAIN2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slain2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLAIN2 (m) y el plásmido HDR SLAIN2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slain2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slain2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.