Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Six2 (m): sc-422957
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Six2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Six2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Six2 Antibody (H-4): sc-377193
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Six2 (m) | sc-422957 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Six2 (SIX homeobox 2) est un facteur de transcription à homéodomaine qui régule les décisions de destin cellulaire au cours du développement embryonnaire, avec des rôles majeurs dans l’organogenèse du rein et le maintien des populations de progéniteurs néphroniques. Il agit au sein de réseaux transcriptionnels interagissant avec les voies de signalisation WNT/β-caténine, FGF et BMP afin d’équilibrer l’auto-renouvellement des progéniteurs et leur différenciation. Dans des modèles murins, une altération de l’activité de Six2 perturbe la néphrogenèse et peut entraîner des anomalies congénitales du rein et des voies urinaires, ce qui en fait un gène clé pour l’étude des voies du développement. Six2 est également utilisé comme marqueur et régulateur dans des études de traçage de lignée et de différenciation des progéniteurs rénaux et mésenchymateux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Six2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Six2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Six2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Six2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Six2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Six2 pour l'étude de la signalisation de Six2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Six2 essentiels à la fonction de Six2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Six2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Six2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Six2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Six2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Six2 plasmide HDR (m) et le Six2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Six2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Six2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.